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| Cat. Number | HC23EH |
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| Chemical Name | HC23EH T7高產量RNA合成試劑盒 T7 High Yield RNA Synthesis Kit |
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| References | T7高收率RNA合成試劑盒優化轉錄反應體系，利用T7 RNA聚合酶，以T7啟動子序列為模板的線性雙鏈DNA，以NTPs為底物控制啟動子下游DNA序列，高效合成單鏈RNA。在轉錄過程中，修飾過的核苷酸可以加入底物中制備生物素或染料標記RNA。 該試劑盒可合成長轉錄本和短轉錄本，1 μg DNA模板輸入可產生100 ~ 200 μg的RNA。轉錄合成的RNA可用于各種下游應用，如RNA結構和功能研究、RNase保護、探針雜交、RNAi、顯微注射和體外翻譯等。 產品信息：
產品組分：
應用： 體外RNA合成 運輸和存儲： 干冰運輸。-20℃保存，有效期兩年。 反應體系（僅供參考）：
注意:反應在室溫下進行，由于10×轉錄緩沖液中含有亞精胺，亞精胺濃度過高會導致DNA模板在低溫下沉淀。 備注: 1. 注意不要在反應系統中混入RNase。 2. 實驗設備(如:移液器尖端、產品管等)應嚴格使用RNase Free產品。 3.為了您的安全與健康，請穿白大褂，戴一次性手套。 4. 僅供研究使用! 常見問題解答： 1. 轉錄產量低 模板的質量與成品率密切相關。試驗組的產量顯著低于對照組，可能的原因有:①實驗模板含有抑制成分;模板有問題。 建議:①重新純化模板;②確定模板定量及其完整性;③延長反應時間;④增加模板輸入量;⑤嘗試其他啟動子和RNA聚合酶。 2. 短轉錄產量低 短轉錄起始片段會抑制該反應。當轉錄產物小于100 nt時，延長反應時間至4-8 hs或增加模板量至2 μg均可提高RNA產量。 3.RNA轉錄長度大于預期 如果電泳顯示產物條帶大于預期條帶，可能的原因是:①質粒模板可能沒有完全線性化;②感覺鏈3’端結構突出;③RNA具有未完全變性的二級結構。 建議:①檢查模板是否完全線性化，必要時進行額外線性化;②選擇合適的限制性內切酶，避免3'外翻，或使用Klenow Fragment /T4 DNA聚合酶完成轉錄后再繼續;③用變性凝膠檢測RNA產物。 4. RNA轉錄長度低于預期 如果電泳顯示產物條帶小于預期大小，可能的原因是:①模板中含有類似于T7 RNA聚合酶的終止序列;②模板中GC含量較高。 建議:①降低反應溫度(如30℃)。有時降低溫度可以增加轉錄長度，但會降低產量?；蛘邍L試不同的RNA聚合酶進行轉錄;②若模板GC含量較高，可采用42℃轉錄，或添加SSB以增加產量和轉錄長度。 5. 轉錄產物的電泳跟蹤 電泳過程中出現拖尾現象?？赡茉?①實驗操作過程中被RNase污染;②RNase污染DNA模板。 建議:①使用不含RNase的移液針尖和EP管，佩戴一次性乳膠手套和口罩，所有試劑均使用不含RNase的H2O制備。②重新純化模板DNA。 相關探針產品推薦： HC80202-01 Crispr Cas12a檢測系統用熒光雙標記探針（DNA熒光-淬滅雙標記） 1OD/950元 HC80202-02 Crispr Cas13a檢測系統用熒光雙標記探針（RNA熒光-淬滅雙標記） 1OD/950元 HC80202-03 Crispr Cas13a檢測系統用雙標記探針（RNA Biotin和FAM雙標記） 1OD/1350元 HC80202-04 Crispr Cas12a檢測系統用雙標記探針（DNA Biotin和FAM雙標記）1OD/1150元 HC80202-05 Cas14a檢測系統用熒光雙標記探針（DNA熒光-淬滅雙標記）1OD/950元 HC80202-06 Cas14a檢測系統用雙標記探針（DNA Biotin和FAM雙標記）1OD/1150元 RAA/RPA試劑盒推薦： HP90206-48 RT-RAA核酸擴增試劑盒(試劑條法) 相關Crispr/cas酶： 其他相關蛋白產品： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag) SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag) 重組TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease 重組SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease 上?；菡\生物科技有限公司自2010年成立以來，一直致力于為客戶提供試劑，儀器設備和耗材一站式服務。目前在蘇州和南通的研發生產基地，專注于體外診斷蛋白，靶標蛋白，工業用酶和細胞因子的生產和定制，按照GMP標準，為工業客戶提供大包裝蛋白原料。 更多產品請聯系惠誠生物！ 蛋白原料網站：www.acediag.com 全國統一服務熱線：021- 60496554 24小時手機服務: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 Email：info@e-biochem.com
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