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      1. 您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>HC80201-06 Cas12b sgRNA設計合成與純化
        Cat. Number
        HC80201-06
        Chemical Name
        HC80201-06 Cas12b sgRNA設計合成與純化
        Qty 1
        1套
        References

        CRISPR-Cas12系統在向導RNA的引導下識別含PAM的dsDNA,然后促使靶標dsDNA解鏈,解鏈后的靶標dsDNA中的靶標鏈(TS)與向導RNA形成Rloop,近而釋放出Cas12中的RuvC的活性位點;而剛剛解鏈后的靶標dsDNA中的非靶標鏈(NTS)此時就會被釋放出的活性位點的RuvC切割;這一切割的結果造成靶標DNA的解旋,釋放出的靶標dsDNA的TS被RuvC切割;當Cas12完成對靶標dsDNA中的TS和NTS的切割后(順式切割),會釋放出dsDNA,而此時空間被留出來的RuvC的活性位點,一旦有ssDNA進入,都會被切割(反式切割)。


        Cas12b核酸酶(又名C2c1)是依賴于RNA介導的內切核酸酶,在靶標DNA存在PAM的情況下,可特異地切割靶標雙鏈DNA。最近,來自張鋒團隊的研究表明,來源于嗜酸耐熱菌且切割活性較高的Alicyclobacillus acidophilus Cas12b更適用于與LAMP結合的“一管法”體系。值得一提的是,AapCas12b與AacCas12b識別相同的sgRNA,因此,非常便于用AapCas12b替換之前的AacCas12b。


        CRISPR Cas12a蛋白和CRISPRCas12b蛋白是CRISPR Cas蛋白 Class2 V型中的亞型,V-A cas12a, 又叫cpf1; V-B cas12b, 又稱 c2c1。Cas12b和Cas12a的主要區別是:

        1. 核酸酶結構域不同,Cas12b蛋白的結構域是RuvC;Cas12a蛋白的結構域是RuvC和Nuc。

        2. 向導RNA不同。Cas12b需要crRNA和tracrRNA;Cas12a只需要crRNA,不用tracrRNA。

        3. 酶切方式不同。Cas12b酶切7個交錯核苷酸;Cas12a酶切的是交錯末端,5' overhangs。

        4. 應用技術不同。Cas12b蛋白應用的技術是HOLMES v2;Cas12a?蛋白?應用的技術是DETECTR和HOLMES。


        基于Cas12開發的分子診斷技術主要有DETECTR和HOLMES,其中HOLMES將Cas12a更換為Cas12b后,進一步升級為HOLMES v2。該三種方法原理類似,主要區別是對靶標擴增方法的選擇不一樣。首先,靶標核酸經等溫(RPA或LAMP)或變溫(PCR)方法擴增富集;然后,擴增產物與Cas12-crRNA結合,激活Cas12的附屬切割功能,對ssDNA熒光探針進行切割,釋放熒光基團,形成檢測信號。使用CRISPR/Cas12b編輯基因成敗的關鍵就在于sgRNA。

        CAS12b.png

        上?;菡\生物提供Cas12b sgRNA設計合成與純化。


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        E-002重組CRISPR-Cas12a蛋白100/2000pmol
        E-003重組CRISPR-Cas13a蛋白100/500pmol
        E-004重組SUMO蛋白酶1000U
        E-005重組TEV蛋白酶1000/10000U
        E-006Spike Protein (RBD, mouseFc Tag)1mg/10mg
        E-007Spike Protein (S1 Subunit, His Tag)1mg/10mg
        VISC2-S002重組全長S蛋白 100ug/1.0mg
        VISC2-RB04RBD蛋白 (RBD Subunit,His Tag)100ug/1.0mg
        VISC2-RB05RBD-591蛋白(RBD-591 Subunit,His Tag)100ug/1.0mg

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